מאיה רודולף החלה את דרכה בלהקת האילתור המהוללת Groundlings. ב-2000 החלה להופיע ב"סאטרדיי נייט לייב" והמשיכה כבדרנית קבועה בתוכנית במשך שבע שנים, מגלמת דמויות כגון אופרה וינפרי, דונטלה ורסאצ'ה ומישל אובמה. בקולנוע הופיעה ב"מה קרה בגטקה?" (1999) עם איתן הוק, "דואט" (2000) עם גוינת' פלטרו, "50 דייטים ראשונים" (2004) עם אדם סנדלר, "מדריך לחיים בכפר" (2006) של רוברט אלטמן ו"שרק 3".
